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深圳科软KR仿手工甩干式不堵孔洗板机之PCR-ELISA技术的应用实例

发布时间:2014-02-09 00:15    来源:www.fuhai31.com
[摘要] 雷伯钧等以共价交联在P C R 管壁上的寡核苷酸作为固相引物进行P C R 扩增,对P C R扩增的固相和液相产物分别进行杂交和凝胶电泳检测的P C R - E L I S A法,对黑龙江省常规选育品种合丰3 5和黑农37、外源D N A 直接导入大豆的分子育种所获品种黑生101及大连进口的美国2 号等大豆,进行转基因定性检测。结果表明该方法高效可靠,可作为一种快速定性检测转基因产品的方法。
        科软仿手工甩干式全自动洗板机是传统洗板机和传统甩干机的有机组合的一体机。相对传统洗板机而言,其最大特点是:1、不用人工拍板;2、不会堵针;3、故障低;4速度快。

       不吸液:删除吸液针等吸液系统,利用旋转和重力去液。

       无污染:水平放板,旋转向下甩液,保证最大程度去液。独特锅底状接液设计,极难反溅。独有的防污染预处理洗板程序。

       免拍板:微孔内无残留,洗好后不用人工拍板。免除拍板给环境和使用者造成的不利影响。

       不堵孔:无吸液针,极大地降低堵孔风险。注液针防堵孔处理,实现注液针不堵孔。闲时管路自动清洗,避免结晶堵塞。开关机自动维护,保证管路内畅通无阻。

       不撞针:注液针不移动,与微孔板保持足够距离,有效保护酶标板和孔内包被。

       可条洗:每块板可以任选条数进行清洗,节省洗液,保护环境。

       速度快:一次可洗16块板,KR306洗好6块板约4分钟。

        茹等应用地高辛标记的PCR-ELISA(Dig-PCR-ELISA)技术对转基因水稻普遍存在的花椰菜花叶病毒(C a M V ) 3 5 S启动子(p35S)、胭脂碱合成酶(N O S )终止子(T nos),筛选标记潮霉素磷酸转移酶基因(hpt,hph)、P-葡萄糖苷酸酶基因(gus)、抗草丁膦除草剂基因(bar)进行了半定量检测。敏感性比较实验表明,D ig-PCR-ELISA检测比常规电泳检测敏感性提高了 1 000倍,含量检测敏感性可达0 . 1 %。同时,在同样条件下对上述5 种基因均进行了常规P C R 检测,并对P C R 产物进行了序列分析,结果表明,所得的基因序列与Genebank中的相应序列吻合,从而证明了 Dig-PCR引物及反应条件的特异性和可靠性。
        雷伯钧等以共价交联在P C R 管壁上的寡核苷酸作为固相引物进行P C R 扩增,对P C R扩增的固相和液相产物分别进行杂交和凝胶电泳检测的P C R - E L I S A法,对黑龙江省常规选育品种合丰3 5和黑农37、外源D N A 直接导入大豆的分子育种所获品种黑生101及大连进口的美国2 号等大豆,进行转基因定性检测。结果表明该方法高效可靠,可作为一种快速定性检测转基因产品的方法。
        H.J. Brunnert等通过以地高辛标记的PCR-ELISA(Dig-PCR-ELISA)建立了检测椰菜花叶病毒( C a M V ) 3 5 S启动子(p35S)的方法,并通过该方法来鉴别转基因含量范围在0 . 1 %〜2 % 之间的抗农达大豆。实验结果表明,该方法是一种简便快速、灵敏性强、特异性较高的方法。该方法还同样适用于其他所导人的外源基因的检测,且避免了常规的凝胶染色中溴乙锭的使用。

 

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