深圳科软KR仿手工甩干式侧立式洗板机之单克隆酶免疫色度分析筛选方法
科软仿手工甩干式全自动洗板机是传统洗板机和传统甩干机的有机组合的一体机。相对传统洗板机而言，其最大特点是：1、不用人工拍板；2、不会堵针；3、故障低；4速度快。
不吸液：删除吸液针等吸液系统，利用旋转和重力去液。
无污染：水平放板，旋转向下甩液，保证最大程度去液。独特锅底状接液设计，极难反溅。独有的防污染预处理洗板程序。
免拍板：微孔内无残留，洗好后不用人工拍板。免除拍板给环境和使用者造成的不利影响。
不堵孔：无吸液针，极大地降低堵孔风险。注液针防堵孔处理，实现注液针不堵孔。闲时管路自动清洗，避免结晶堵塞。开关机自动维护，保证管路内畅通无阻。
不撞针：注液针不移动，与微孔板保持足够距离，有效保护酶标板和孔内包被。
可条洗：每块板可以任选条数进行清洗，节省洗液，保护环境。
速度快：一次可洗1—6块板，KR306洗好6块板约4分钟。
A O A C 方法：986. 3 5； 987. 1 1； 993. 0 8 均为单克隆酶免疫色度分析筛选方法。现以A O A C 公定方法993.08《食品中沙门氏菌单克隆酶免疫比色检测方法（3 &111101^113-丁4 )》为例做一介绍。该方法是对所有食品中沙门氏菌的存在进行筛选，不是确证试验，因为试验中所用的单克隆抗体可能与少部分的非沙门氏菌有交叉反应。阳性的检测结果应是客观的，必须用配有450 n m 滤光片的光度计来进行测试。只有当阴性和阳性对照均有可接受的光密度读数时，阳性结果才是有效的。
(一）原理
沙门氏菌抗原的检测是基于用特异性单克隆抗体进行的酶免疫分析（E I A )。用抗沙门氏菌抗原的单克隆抗体包被于聚苯乙烯微量板小孔的内表面。将样品和对照加入小孔中。样品中如有沙门氏菌抗原存在，则将被吸附在孔上的特异性抗体吸收。冲洗小孔后，加入接合剂与被抗体吸收的沙门氏菌抗原结合。再冲洗小孔，除去未结合的结合剂。然后再加人酶底物。当用终止液终止反应时，出现的蓝色则转变为黄色。样品中是否有沙门氏菌抗原取决于该颜色产生的光密度。
(二）仪器
①微量条板架：能放置1〜8 个微量条板的聚苯乙烯框架。
②条板密封纸：覆盖微量板的黏合纸。
③包装说明书。
④ 培养箱：能于(35 °C〜37 °C)±0. 1 °C恒温。
⑤ 水浴箱：能于42 °C±0. 5 °(：和35 ° C ± 1 . 0 °C恒温；能于100 ° C±0 . 1°C恒温。（注：也可用100 °C的高压灭菌器或流动蒸汽发生器代替）。
⑥ 手动或自动E I A 冲洗系统：系统设计为冲洗12 X 8 微量板的被包被的小孔。包括用于吸小孔内容物的真空泵和用于将冲洗液注入各小孔的分装系统。
⑦ E I A 板读数器:具有450 n m 滤光片的光度计。能读出微量板的数据。
⑧微量移液器：能精确地移放50 juL〜200 fxL液体的单管或多管的移液器。一次性的微量吸嘴。
⑨ 储液槽:多管移液器用的的试剂储存槽。用于容纳分装到微量板小孔内的E I A试剂。
⑩取小孔条的工具。
⑪没有包被的孔穴：黑环标记。
(三）试剂
①包被抗体的微量条板：聚苯乙烯微量条板，每个条板包含用沙门氏菌的单克隆抗体包被的1 2个小孔。于2 °C〜8 °C储存。
② 对照抗原：
a ) 阳性对照：加热灭活冻干的圣地亚哥沙门氏菌（可与沙门氏菌抗体反应）。
b ) 阴性对照：冻干的1 % 脱脂奶粉（不与沙门氏菌抗体反应）。两种对照均以0. 1 m g / m L硫酸艮他霉素作为防腐剂。
③接合剂与接合剂稀释液:与过氧化物酶接合的沙门氏菌抗体用含有蛋白质稳定剂和抗生素的P H 7 . 6的Tris缓冲液稀释,2 °C〜8 °0储存可保持稳定1 2个月。
④ T M B 过氧化物酶底物(溶液A ) :含有0.4 g/ L 3，3’5，5’-四甲联苯胺的专用的有机试剂。
⑤ T M B 过氧化物酶底物(溶液B ) :含有0 . 0 2 %过氧化氢的枸橼酸缓冲液。
⑥ 25 倍浓缩的冲洗液：19. 2 5 % H C 1 、1. 25% 吐温 2 0、0. 5 2 5 % K H 2P 0 4 和 1. 825% 的水溶液。
⑦ 终止液：1 m o l / L硫酸（当心：避免与皮肤接触，一旦接触，用水彻底冲洗接触部位）。
⑧ M N 肉汤（加有10 y g / m L 新生霉素的M 肉汤），5. 0 g 酵母浸膏，12. 5 g 胰蛋白胨，2. 0g 1>甘露糖，5. 0 g 枸橡酸钠，5. 0 g NaCl,5. 0 g K 2H P 0 4 >0. 14 g M n C l 2,0. 8 g M g S 0 4，0. 04 F e S 0 4 和0. 75 g 吐温8 0。混悬各成分于1 L H 20 中。加热至煮沸1 m i n〜2 m i n。分装于16 m m X 1 2 5 m m 带螺旋帽的试管中，每管9 m L 。旋松试管帽。于121 °C高压灭菌15 m i n。制备新生霉素储备液（100 y g / m L 水溶液）并过滤除菌。以无菌操作，于每一灭菌的M N 肉汤管中加1.0 m L 新生霉素溶液。新生霉素贮备液可储存于一70 °C，但解冻后，不可再次冷冻。
⑨诊断试剂（用于鉴定E I A 检测阳性的培养物）。