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IHC试剂盒实验样品制备与固定试剂选择

发布时间:2013-09-13 11:55    来源:www.fuhai31.com
[摘要] IHC试剂盒实验样品制备与固定试剂选择.巴傲得生物科技有限公司是专业从事专业IHC试剂盒、质粒构建、最先进的蛋白表达、抗体定制权威机构、proteinA产品。等生命科学研究的专业技术型企业。从事生物技术产品的开发及销售,致力于将巴傲得生物打造成中国乃至世界一流的生物技术产品供应商。咨询热线:025-68037686

据南京巴傲得生物科技有限公司2013年9月13日12:00最新数据分析:IHC试剂盒实验样品制备与固定试剂选择.巴傲得生物科技有限公司是专业从事专业IHC试剂盒、质粒构建、最先进的蛋白表达、抗体定制权威机构、proteinA产品。等生命科学研究的专业技术型企业。从事生物技术产品的开发及销售,致力于将巴傲得生物打造成中国乃至世界一流的生物技术产品供应商。咨询热线:025-68037686

细胞样本在开展ICC研究时,首先必须将细胞附着在固体支持物上,如显微镜载玻片或盖玻片。这对于贴壁细胞很简单,

它们可直接放置在6孔或24孔板底部的高级无菌盖玻片上生长。将盖玻片预包被一层带电荷的聚合物(如多聚赖氨酸)和/或细胞外基质蛋白(如层粘连蛋白、纤维粘连蛋白或胶原),可增强细胞附着。染色过程的所有步骤可在微孔板内的盖玻片上开展,向每个孔中加入适当的溶液并移走溶液。悬浮细胞可通过Cytospin® 离心或与包被多聚赖氨酸的玻片孵育10分钟而附着在玻片上。

IHC/ICC实验中使用的所有样本必须经过固定,以维持组织形态,并保留目的分子的抗原性。固定改变了组织的化学组成,因此往往需要在维持组织结构和保留表位之间进行折衷。细胞或组织的不完全固定(固定不足)可能造成组织内目的蛋白的快速水解,并降低了特异的免疫反应性。然而,过度的固定(固定过度)可能导致表位的遮蔽或强的非特异背景染色,这可能会掩盖特异的标记。

理想的固定剂当然是:最好地保持细胞和组织的形态结构,并最大限度地保存抗原的免疫活性。然而,迄今为止尚无一种标准固定液能用于各种不同的抗原固定。经同一固定液固定后,不同组织可能呈现截然不同的染色结果。因此,不同的抗原和样本必须反复试验,选择最佳的固定剂。

 

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