植物提取物母液制备流程及测定
发布时间：2018-09-25 18:37 来源：www.fuhai31.com
[摘要] 1.2.1 植物提取物母液制备
博落回母液：称取1.00 g博落回散加入9 mL无菌水中，混合均匀，制成10%母液；
肉桂醛母液：称取1.00 g肉桂醛加入4 mL二甲基亚砜中，混合均匀，超声波超声30 min，制成20%母液；
香芹酚母液：吸取1 mL香芹酚加入4 mL二甲基亚砜中，混合均匀，制成20%母液。
1.2.1 植物提取物母液制备
博落回母液：称取1.00 g博落回散加入9 mL无菌水中，混合均匀，制成10%母液；
肉桂醛母液：称取1.00 g肉桂醛加入4 mL二甲基亚砜中，混合均匀，超声波超声30 min，制成20%母液；
香芹酚母液：吸取1 mL香芹酚加入4 mL二甲基亚砜中，混合均匀，制成20%母液。
1.2.2 牛津杯琼脂扩散测定抑菌圈
将博落回母液用无菌水稀释至5%、1%、0.1%、0.01%。植物提取物供应商应该保证实验室的设备符合实验条件。
将肉桂醛、香芹酚母液用二甲基亚砜稀释至5%，再用无菌水稀释至1%、0.1%、0.01%。
将二甲基亚砜用无菌水稀释至5%、1%、0.1%、0.01%，作为不同浓度的试剂空白对照。
在超净台里，用无菌接种环挑取一环副溶血弧菌菌苔接种于2216E培养基中180r/min 30 ℃振荡培养12-18 h，稀释10-100倍，以布满平板又不过浓为准，取100 μL涂布于2216E平板上，用无菌镊子夹取牛津杯放于涂好的平板表面，每皿放置4个，分别加200 μL 5%、1%、0.1%、0.01%的不同植物提取物试样，每种三个平行。将平板轻放于恒温培养箱中，30 ℃培养12-24 h观察抑菌圈，用游标卡尺测量直径。
博落回母液：称取1.00 g博落回散加入9 mL无菌水中，混合均匀，制成10%母液；
肉桂醛母液：称取1.00 g肉桂醛加入4 mL二甲基亚砜中，混合均匀，超声波超声30 min，制成20%母液；
香芹酚母液：吸取1 mL香芹酚加入4 mL二甲基亚砜中，混合均匀，制成20%母液。
1.2.2 牛津杯琼脂扩散测定抑菌圈
将博落回母液用无菌水稀释至5%、1%、0.1%、0.01%。植物提取物供应商应该保证实验室的设备符合实验条件。
将肉桂醛、香芹酚母液用二甲基亚砜稀释至5%，再用无菌水稀释至1%、0.1%、0.01%。
将二甲基亚砜用无菌水稀释至5%、1%、0.1%、0.01%，作为不同浓度的试剂空白对照。
在超净台里，用无菌接种环挑取一环副溶血弧菌菌苔接种于2216E培养基中180r/min 30 ℃振荡培养12-18 h，稀释10-100倍，以布满平板又不过浓为准，取100 μL涂布于2216E平板上，用无菌镊子夹取牛津杯放于涂好的平板表面，每皿放置4个，分别加200 μL 5%、1%、0.1%、0.01%的不同植物提取物试样，每种三个平行。将平板轻放于恒温培养箱中，30 ℃培养12-24 h观察抑菌圈，用游标卡尺测量直径。